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SNSPD透视小鼠脑部的奥秘

当光穿透生命的“迷雾”:显微镜的进化革命

 

在生物医学领域,科学家们一直渴望拥有“透视眼”——既能看清细胞级的精细结构,又能穿透层层组织直达器官深处。然而,传统荧光成像受限于可见光的高散射性,如同在迷雾中打手电筒,光线被不断反射,最终只能模糊捕捉表层信息。

近日,浙江大学钱骏课题组联合多所机构利用第二近红外窗口(NIR-II)的“超长波”光,结合赋同量子的高灵敏度SNSPD和飞秒激光技术,首次实现小鼠脑部毫米级深度的三通道高清成像,让科学家得以在活体组织中“看”得更深、更清晰、更丰富!

SNSPD透视小鼠脑部的奥秘
图1 多通道显微镜成像系统示意图

 

核心突破:为何1400 nm是“黄金波长”?

 

传统NIR-II成像(900-1880 nm)虽优于可见光,但不同子波段的成像效果差异巨大。研究团队通过对比实验发现:

1300 nm滤光片:信号强,但背景噪音高,如同拍照时开了高ISO,画面粗糙。

1400 nm滤光片:信号稍弱,但因水分子在1400-1500 nm波段吸收散射光子,背景噪音大幅降低,信噪比提升23%,可分辨3.5微米血管(相当于头发丝的1/20)。

1500 nm滤光片:信号过弱,难以捕捉深层结构。

关键机制:1400 nm以上的光能巧妙利用生物组织中的水分“清洁背景”,如同在迷雾中架起滤网,只保留有效信号。这一发现为超深成像提供了全新策略!

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图2 使用1177 nm连续波激光激发对小鼠脑血管进行体内近红外二区共聚焦显微镜成像

 

飞秒激光:一束光,六种颜色,开启多通道“光影秀”

 

如何在同一系统中实现多目标追踪?团队祭出“黑科技”——930纳米飞秒激光。它不仅是NIR-II荧光的激发源,还能通过多光子效应激发可见光荧光,实现“一光多用”:

多光子激发:飞秒激光脉冲能量极高,可同时激发蓝、绿、红可见荧光(可标记神经元、星形胶质细胞)。

NIR-II共聚焦:长波荧光穿透更深,专攻血管和肾脏结构成像。

六通道同步:通过精密分光系统,小鼠脑部可同时呈现血管(红)、神经元(绿)、胶质细胞(蓝)的三色影像,肾脏中肾小球与肾小管也清晰可分!

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图3 使用930 nm飞秒激光激发对小鼠脑血管进行体内近红外二区共聚焦显微镜成像

 

活体成像实拍:脑部血管、肾脏结构的“高清纪录片”

 

小鼠脑部成像:在无需开颅的活体状态下,穿透1.2毫米组织,捕获200微米深处的神经元网络与微血管动态,分辨率达3.5微米。

肾脏双通道追踪:绿色标记的肾小管细胞与红色标记的肾小球同框呈现,首次在220微米深度实现结构解析,为肾病研究提供新工具。

趣味彩蛋:实验中,若染料未彻底清洗,血管在红光通道会呈现“负片效果”,与NIR-II信号精准对应,仿佛组织自带“防伪水印”!

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图4:小鼠肾脏的体内双通道显微镜成像。(a) 成像装置示意图。用罗丹明123标记后,肾小管呈现绿色,而用1450量子点标记后,肾小球和肾血管呈现红色。(b) 小鼠肾脏组织双通道成像的三维重建图。(c)-(f) 在不同深度拍摄的双通道显微镜图像。双光子荧光成像在大约100μm深度内有效,而近红外荧光共聚焦可将可观测深度扩展到约220μm

 

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图 5 小鼠大脑的体内三通道显微镜成像

 

让不可见变为可见

 

从模糊到清晰,从单色到多彩,从表层到深层——这项研究助力科学家在活体中窥见生命的精妙细节。正如钱骏教授所言:“我们正用光编织一张更精细的‘生命图谱’,未来或将彻底改变疾病诊断与治疗的方式。”

科学,终将照亮每一个未知的角落。

原文链接:

https://www.jpier.org/issues/volume.html?paper=24101003